布氏杆菌抗体磁微粒化学发光免疫分析方法的建立

摘要

为解决布氏杆菌病传统检测方法精度不足、效率低下等问题，本研究拟建立一种高效、准确的布氏杆菌病抗体检测方法。采用光滑型布氏杆菌脂多糖(sLPS)包被磁珠，并以吖啶酯标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA),在方法优化和临界值确定的基础上，建立布氏杆菌病磁微粒化学发光免疫分析(CLIA)抗体检测方法。进一步对该方法的敏感性、特异性、重复性及稳定性进行验证，并应用于临床样品检测。通过对250份背景已知的临床血清样本检测，确定该方法的临界值为5 686 RLU。性能验证结果表明，该方法具有良好的特异性，对羊源和牛源布氏杆菌阳性血清的最低检出量均为1 IU/mL,批内和批间变异系数均<10%,在2～8℃条件下保存15个月仍保持稳定性能。该方法检测结果较为准确，与市售布氏杆菌抗体ELISA检测试剂盒的总符合率为92.9%。本研究建立的检测方法具有操作简便、快速高效、稳定性强等优势，可为布氏杆菌病的诊断与防控提供可靠的技术手段。

关键词

布氏杆菌病 / 磁微粒化学发光免疫分析 / 高通量抗体检测 / 临床应用

基金资助

省级现代农业产业技术体系创新团队建设项目(2024CXTD15和2024CXTD15-01); 广东省农村科技特派员重点派驻任务项目(KTP20240183); 广东省科技计划项目(2023A1111110001); 2025年绿美广东生态建设重点任务保障(林业领域)专项; 广州市科技计划项目(2023B04J0137); 广东省畜禽疫病防治研究重点实验室项目(2023B1212060040)