高尔基体膜蛋白1对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制

摘要

目的 探讨高尔基体膜蛋白1(GOLM1)在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其对OSCC细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化（EMT）的影响和作用机制。方法 利用生物信息学分析在TCGA数据库和GTEx数据库中有关头颈鳞状细胞癌（HNSCC）的数据，分析GOLM1在HNSCC中的表达情况及对其预后的影响。免疫组织化学法检测GOLM1在OSCC组织和癌旁组织中的表达情况。提取人正常口腔角质细胞（HOK）及OSCC细胞系HSC-3和SCC-25中GOLM1的mRNA和蛋白，利用荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质免疫印记法（Western blot）检测GOLM1的表达差异。选取HSC-3和SCC-25进行体外实验，利用慢病毒转染沉默GOLM1，并通过qRT-PCR和Western blot验证转染效果；CCK-8和集落形成实验检测细胞增殖能力；划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力；Western blot检测EMT相关蛋白E-钙粘蛋白（E-cadherin）、N-钙粘蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）的表达变化。基因集富集分析（GSEA）筛选GOLM1可能的作用通路，并通过Western blot和挽救实验进行验证。结果 生物信息学分析结果发现GOLM1在HNSCC中高表达且与其预后不良有关。GOLM1在OSCC组织中高表达。GOLM1在OSCC细胞系HSC-3和SCC-25中的表达水平显著高于HOK。沉默GOLM1后，OSCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著降低；E-cadherin的表达显著上升，而N-cadherin和Vimentin的表达显著下降。GSEA分析显示GOLM1与转化生长因子-β(TGF-β)信号通路密切相关；沉默GOLM1后，TGF-β1、Smad2和p-Smad2的表达降低；外源性重组人TGF-β1蛋白刺激可逆转沉默GOLM1导致的OSCC细胞增殖、迁移和侵袭能力降低。结论 GOLM1在OSCC组织和细胞中高表达，沉默GOLM1可通过TGF-β1/Smad2通路抑制OSCC细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT。

关键词

口腔鳞状细胞癌 / 高尔基体膜蛋白1 / 上皮间充质转化 / 转化生长因子-β1/Smad2