低温诱导毛白杨花粉染色体加倍技术体系的优化

摘要

【目的】确定低温诱导毛白杨花粉染色体加倍获得2n花粉的适宜温度范围，提高2n花粉诱导效率，优化完善低温诱导毛白杨花粉染色体加倍选育林木多倍体的技术体系。【方法】本研究以山西朔州的毛白杨雄花枝为试验材料，利用醋酸洋红染色法，在探究毛白杨雄花芽不同发育时期对低温敏感性差异的基础上，开展低温诱导毛白杨花粉染色体加倍技术条件的优化研究；利用获得的低温诱导型2n花粉与毛白杨、银腺杨雌株进行授粉杂交，通过流式细胞术和体细胞染色体计数法检测倍性。【结果】（1）相较于花粉母细胞时期，处于减数分裂阶段的毛白杨花粉母细胞对低温更加敏感，低温处理诱导毛白杨产生2n花粉的适宜温度范围为-13～-7℃；（2）处理温度、减数分裂时期和持续处理时长均对毛白杨2n花粉诱导率具有极显著影响，确定了利用-13℃的低温对发育至减数分裂Ⅱ中期的花粉母细胞进行5 h的持续处理是低温诱导毛白杨花粉染色体加倍的最佳处理组合，其2n花粉诱导率可达（31.11±2.93）%;（3）利用高频率的低温诱导型2n花粉分别与毛白杨、银腺杨单倍性雌配子进行授粉杂交，成功获得26株三倍体。【结论】本研究优化并完善了低温诱导毛白杨花粉染色体加倍选育三倍体的技术体系，提高了2n花粉诱导率，并通过低温诱导型2n花粉杂交获得了26株三倍体，建立了一种高效稳定的林木三倍体诱导方法。研究结果将为推动林木三倍体育种理论和技术的发展奠定重要的基础。

关键词

毛白杨 / 低温 / 染色体加倍 / 2n花粉 / 花粉败育 / 三倍体育种 / 遗传改良