FabHLH37调控草莓抗灰霉病的功能分析

摘要

[目的]本文旨在通过验证草莓bHLH(basic/helix-loop-helix)家族转录因子FabHLH37的功能，解析其调控草莓抗灰霉病的机制，为草莓的抗病育种提供新的基因资源。[方法]以栽培草莓品种‘红颜’为试验材料，提取灰霉菌侵染后的草莓果实总RNA并反转录为cDNA,克隆FabHLH37编码区序列，并使用在线软件对其进行生物信息学分析；利用实时荧光定量PCR(qPCR)分别检测该基因在草莓不同组织及果实接种灰霉菌后的相对表达量；利用烟草瞬时表达系统研究该基因的亚细胞定位；通过草莓果实瞬时表达系统研究FabHLH37抗灰霉病功能。[结果]FabHLH37基因CDS全长789 bp,编码262个氨基酸，理论等电点(pI)为6.61,相对分子质量为2.9×10~5。进化分析显示FabHLH37与月季、苹果等蔷薇科植物bHLH37蛋白同源关系较近。亚细胞定位分析显示FabHLH37特异性定位于细胞核。qPCR分析表明FabHLH37在草莓根中表达量最高，叶次之，灰霉病菌侵染可以显著诱导FabHLH37基因的表达。草莓果实瞬时表达结果显示，与对照相比，过表达FabHLH37的草莓果实接种灰霉菌后感病程度轻，而沉默FabHLH37的草莓果实相反。进一步的qPCR检测发现，在草莓果实瞬时表达体系中，FaPR1/4/5-1、FaBG2-1、FaCHI3-1、FaSOD、FaPAL等多个防御基因的表达量与FabHLH37的表达量呈正相关，即过量表达FabHLH37可显著提高这些基因的表达量，而沉默FabHLH37则显著降低这些基因的表达量。[结论]FabHLH37可通过诱导防御基因的表达从而正向调控草莓灰霉病。

关键词

草莓 / 灰霉病 / bHLH转录因子bHLH37 / 防御基因