沙门菌噬菌体YT90的分离鉴定及生物学特性分析

李刚; 董雨豪; 黄昊; 孙千惠; 刘永杰

南京农业大学学报 ›› 2024, Vol. 47 ›› Issue (02) : 306 -314.

李刚, 董雨豪, 黄昊, 孙千惠, 刘永杰

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摘要

[目的]本文旨在分离针对肠炎沙门菌的烈性噬菌体并研究其生物学特性。[方法]从山东烟台某鸭场采集58份粪便样品，以鸭源肠炎沙门菌sdc-11为宿主分离噬菌体，并对噬菌体分离株进行形态学观察，对其温度和pH值稳定性、感染复数(MOI)、一步生长曲线进行测定和分析，测试其对71株不同血清型沙门菌的裂解谱，以及对沙门菌sdc-11生物被膜形成的抑制和对成熟生物被膜的清除作用，最后进行基因组测序分析。[结果]分离获得1株长尾噬菌体，命名为YT90。该噬菌体在30～60℃和pH值4～10的条件下，均表现出较好的增殖能力，最佳MOI值为10~(-5),潜伏期10 min,裂解期90 min,裂解量为每细胞278 PFU;可裂解66.7%(14/21)肠炎沙门菌、66.7%(28/42)鼠伤寒沙门菌和75.0%(3/4)鸡白痢沙门菌；在96孔细胞板上，YT90具有抑制沙门菌sdc-11生物被膜形成的潜力，并能有效清除成熟生物被膜；全基因组测序发现，YT90的基因组全长121 240 bp,不含已知的毒力因子和耐药相关基因，不编码整合酶；基于末端酶大亚基构建的进化树分析表明，YT90与沙门菌噬菌体GRNsp50关系最近，属于根西病毒亚科(Guernseyvirinae)新泽西病毒属(Jerseyvirus)。[结论]从鸭场粪便样品中分离获得1株烈性噬菌体YT90,可裂解多种血清型沙门菌，耐受性强、潜伏期短、裂解量大，在防治沙门菌感染方面有较好的临床应用潜力。