巨型艾美耳球虫Th1类细胞因子刺激性分子EmARM-β对鸡PBMC和T细胞亚群免疫功能的影响

摘要

[目的]本文旨在探讨巨型艾美耳球虫Th1类细胞因子刺激性分子Armadillo/β-catenin样重复序列蛋白(EmARM-β)对鸡免疫细胞功能的影响。[方法]利用密度梯度离心法和免疫磁珠分选法分别分离出鸡外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)、CD8~+T细胞和CD4~+CD25~-T细胞，之后将EmARM-β重组蛋白(rEmARM-β)分别与上述细胞进行体外共孵育6 h,利用CCK-8试剂和qPCR法分别检测并分析其对上述细胞增殖能力及相关细胞因子分泌水平的影响。[结果]经免疫磁珠分选后，流式细胞术检测鸡CD8~+T细胞和CD4~+CD25~-T细胞的纯度分别为93.01%和88.88%。与对照组相比，rEmARM-β显著促进鸡PBMC的增殖能力，显著上调Th1类细胞因子(ifn-γ和il-2)和促炎性细胞因子(il-1β、il-6和il-17a)mRNA水平；显著促进CD8~+T细胞的增殖能力，显著上调其ifn-γ、il-2和tnf-α mRNA水平，显著上调穿孔素、fasl(Fas配体)和fas mRNA水平；能显著促进CD4~+CD25~-T细胞的增殖能力，显著上调其ifn-γ和il-2 mRNA水平，下调il-4和il-10 mRNA水平。[结论]EmARM-β可以有效促进鸡PBMC和T细胞亚群(CD8~+T细胞和CD4~+CD25~-T细胞)的增殖能力，提升其Th1类细胞因子和促炎性细胞因子的分泌水平，提示EmARM-β具有研发鸡球虫病新型疫苗候选抗原的潜力。

关键词

巨型艾美耳球虫 / Th1类细胞因子刺激性分子 / EmARM-β / T细胞亚群 / 免疫功能