WNT6基因对蛋鸡卵泡颗粒细胞的影响及机制研究

祝启钊; 谢晓磊; 杨海霞; 王晋; 片慧芳; 虞德兵

南京农业大学学报 ›› 2023, Vol. 46 ›› Issue (01) : 143 -149.

祝启钊, 谢晓磊, 杨海霞, 王晋, 片慧芳, 虞德兵

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摘要

[目的]本文旨在研究WNT6基因在蛋鸡卵泡发育过程中的生物学功能及其作用机制。[方法]以300日龄海兰蛋鸡为研究对象，检测WNT6 mRNA在不同组织中表达特征。对体外培养的鸡卵泡颗粒细胞进行敲减和过表达WNT6基因后，用CCK-8试剂盒检测细胞增殖，ELISA检测细胞培养基中的孕酮(P4)含量，荧光定量PCR检测卵泡刺激素受体(FSHR)和StAR、CYP11A1等基因表达水平。设立卵泡刺激素(FSH)浓度梯度处理体外培养的蛋鸡卵泡颗粒细胞，研究FSH对WNT6及WNT通路相关基因表达水平的影响。[结果]WNT6 mRNA在蛋鸡卵泡颗粒细胞内特异表达，在处于卵泡选择关键时期的小黄卵泡颗粒细胞内具有最高表达水平；与对照组相比，过表达WNT6极显著促进颗粒细胞增殖(P<0.01),极显著提高颗粒细胞P4合成量(P<0.01),并显著提高FSHR、CYP11A1、StAR、CYP19A1和HSD3B1基因表达水平(P<0.05);相反，敲减WNT6后颗粒细胞增殖被抑制(P<0.01),P4合成量极显著显著减少(P<0.01),并显著降低FSHR、CYP11A1、StAR、CYP19A1和HSD3B1基因表达水平(P<0.05);FSH呈剂量依赖性促进WNT6基因表达(P<0.05),还可显著提高颗粒细胞LRP1基因表达水平(P<0.05),而极显著降低FOXO1基因表达水平(P<0.01)。[结论]WNT6在蛋鸡卵泡颗粒细胞内特异性表达，其表达水平受FSH调控，WNT6促进颗粒细胞增殖与类固醇激素合成，并提高颗粒细胞FSHR基因表达表达水平。WNT6协同FSH促进蛋鸡卵泡发育并调控蛋鸡卵泡选择。