野山杏总黄酮对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用

摘要

[目的]野山杏具有良好的抗炎作用，尤其是其总黄酮成分，本文旨在研究野山杏总黄酮的抗炎机制。[方法]该研究基于脂多糖（LPS）刺激RAW264.7细胞产生炎症，构建体外细胞炎症模型，以MTT法检测不同浓度野山杏总黄酮对RAW264.7巨噬细胞活性的影响以筛选适宜的浓度；分别采用Griess法和酶联免疫吸附试验（ELISA）测定50、100、200μg·mL^-1野山杏总黄酮作用后各组细胞中一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、聚乙二醇链（PGE₂）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）和环氧化酶2（COX-2）的释放量；RT-PCR分析各组中COX-2、IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA的相对表达水平；免疫印迹（WB）试验观察各组中NF-κB p65、p-NF-κB p65和COX-2蛋白的表达。[结果]细胞活力试验表明野山杏总黄酮在50～200μg·mL^-1对细胞无毒性作用，为安全浓度范围。野山杏总黄酮可以显著抑制LPS刺激RAW264.7细胞释放NO,且呈剂量依赖性抑制。野山杏总黄酮不同剂量组(50、100、200μg·mL^-1)呈剂量依赖性抑制COX-2、TNF-α mRNA的表达，100μg·mL^-1和200μg·mL^-1时显著抑制IL-1β mRNA的表达。蛋白印迹结果表明，野山杏总黄酮处理可显著下调NF-κB p65、p-NF-κB p65和COX-2蛋白的表达。[结论]野山杏总黄酮通过抑制NF-κB/COX-2信号通路减少细胞炎症因子的释放和炎症相关蛋白的表达，从而发挥良好的抗炎作用。

关键词

野山杏 / 总黄酮 / RAW264.7细胞 / 脂多糖 / 炎症 / 信号通路