高低繁殖力湖羊生殖激素水平分析及不同大小卵泡差异miRNA筛选

摘要

[目的]本文旨在分析不同繁殖力湖羊生殖激素水平差异，筛选调控卵泡发育的差异微小RNA（miRNA）,构建与绵羊繁殖力相关的miRNA表达谱。[方法]选取体况相近、生殖生理状态相似的27只不同繁殖力（高繁殖力，HP;低繁殖力，LP）2～3岁经产空怀湖羊，根据其繁殖力和基因型（FecBB,BB;FecB+,B+）将其分为3组：HPBB、LPBB和LPB+,对其进行同期发情处理，发情时密集采血3 h（每次间隔12 min）,检测血清中FSH、LH以及E₂含量；采血结束后，屠宰并摘取卵巢，剥离单侧卵巢的不同大小健康卵泡用于RNA-Seq。[结果]HPBB组血清中LH浓度显著高于LPBB组和LPB+组（P<0.05）;BB型（HPBB和LPBB）湖羊血清中FSH和E₂浓度显著高于B+型（LPB+;P<0.05）;RNA-Seq共鉴定了2 935个miRNA,包含141个已知miRNA和2 794个新miRNA,且miRNA序列长度主要为22 nt,其次为21 nt;在横向（不同繁殖力与基因型）与纵向（不同大小卵泡）18个差异分组中均筛选到一定数量的差异miRNA;利用GO和KEGG对其进行功能富集分析，在>5 mm的各比较组中差异miRNA主要富集到TGF-β、PI3K-Akt、TNF等与繁殖相关的信号通路；构建了与繁殖力相关miRNA-mRNA和circRNA-miRNA-mRNA互作网络。[结论]本研究不仅从内分泌角度分析了LH与湖羊的繁殖力存在一定的相关性，而且从miRNA的角度筛选并绘制了与卵泡发育相关的表达图谱，研究结果为明晰绵羊繁殖能力的分子机制奠定基础。

关键词

繁殖力 / 湖羊 / 卵泡 / miRNA / 表达谱 / 生殖激素