GCRV非结构蛋白NS38调控宿主蛋白SAMHD1的机制

摘要

为探究GCRV编码的蛋白在病毒与宿主间相互作用及免疫逃逸中的具体作用机制,本研究聚焦于Ⅰ型GCRV的非结构蛋白NS38,通过免疫共沉淀联合质谱分析,筛选并鉴定出草鱼SAMHD1蛋白为NS38的相互作用蛋白。免疫共沉淀和亚细胞定位实验证实二者在细胞内直接结合,并共定位于细胞质中,截短实验表明,SAMHD1的HD结构域是介导其与NS38互作的关键区域。进一步实验表明, SAMHD1对GCRV复制具有一定的抑制作用:在草鱼CIK细胞中过表达SAMHD1可显著降低病毒拷贝数并缓解细胞病变效应,而通过RNA敲降SAMHD1则促进病毒复制。值得注意的是, SAMHD1的抗病毒作用不依赖于干扰素通路的激活,更可能依赖于其dNTP三磷酸水解酶活性,通过消耗细胞内的dNTP储备来限制病毒逆转录从而阻断病毒复制。同时发现, GCRV NS38可通过自噬-溶酶体途径诱导SAMHD1降解,从而拮抗其抗病毒功能。本研究揭示了一种GCRV免疫逃逸的新机制,即NS38通过靶向降解SAMHD1蛋白实现免疫逃逸。本发现深化了对GCRV致病机制的认知,为抗GCRV疫苗的研制提供了潜在靶点。

关键词

草鱼呼肠孤病毒 / NS38 / SAMHD1 / 自噬 / 拮抗 / 免疫逃逸