单一内标定量核磁法测定肺炎链球菌多糖抗原中荚膜多糖、C-多糖和磷含量

摘要

肺炎糖疫苗在预防由肺炎链球菌引起的肺炎和脑膜炎等疾病中发挥关键作用。荚膜多糖、C-多糖和磷含量是疫苗研发和生产中多糖抗原质量控制的重要指标，研究发展了基于单一内标物六甲基磷酰三胺（hexamethylphosphoramide,HMPA）的定量¹H NMR和³¹P NMR法，实现6A,6B,18C,19A,19F及23F型肺炎链球菌多糖抗原中荚膜多糖、C-多糖和磷含量的同步测定。利用内参物比较法，探究了多糖溶解性质对定量核磁测定的影响，发现定量¹H NMR的测定结果受到多糖水溶液黏度和浓度的影响。发现高黏度多糖在3～15 mg/m L，低黏度多糖在5-25 mg/m L是最适检测液浓度范围。该“一内标三定量”NMR法具有良好的精密度、特异性和准确度，为肺炎链球菌疫苗的质量控制提供了一种有价值的新策略。

关键词

肺炎链球菌 / 荚膜多糖 / 定量¹H NMR / 定量³¹P NMR / C-多糖 / 磷

基金资助

国家自然科学基金项目（No.22325803,No.22277042,No.22077052,No.22177041）