基于CRISPR/Cas9系统的原位生物成像方法进展

张惟杰; 尹王文康; 冯家洛; 沈玥; 赵羿; 王琛; 邹秉杰; 宋沁馨

中国药科大学学报 ›› 2025, Vol. 56 ›› Issue (5) : 557 -565.

张惟杰, 尹王文康, 冯家洛, 沈玥, 赵羿, 王琛, 邹秉杰, 宋沁馨

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摘要

原位生物成像技术为直接观察细胞内核酸或蛋白质生物靶标的定位、表达和相互作用提供了强有力的工具，对于深入理解细胞功能和疾病机制至关重要。CRISPR/Cas9系统作为一种革命性的基因编辑工具，近年来也被用于开发高效的原位成像工具。本文综述了近年来发展的基于Cas9蛋白、工程化单链向导RNA(sgRNA)及其偶联荧光标签的CRISPR/Cas9原位成像方法，并对其在活细胞与固定细胞中的应用特点进行了比较分析。文章重点关注了这些方法的特异性、信号放大效率和多重成像能力，并结合当前的研究进展进行了深入讨论，旨在为基于CRISPR/Cas9系统的原位生物成像技术提供更全面的见解和参考概述，并为相关领域的研究提供参考和指导。