银杏内酯B通过PI3K/AKT信号通路抑制MH7A人成纤维样滑膜细胞增殖及其促细胞凋亡

刘璘琛; 徐晓龑; 孙春萌; 俞济荣; 施青; 孙君君; 逄丹丹; 卫斐然; 刘兴

中国药科大学学报 ›› 2025, Vol. 56 ›› Issue (2) : 216 -224.

刘璘琛, 徐晓龑, 孙春萌, 俞济荣, 施青, 孙君君, 逄丹丹, 卫斐然, 刘兴

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摘要

探讨银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对MH7A人成纤维样滑膜细胞（fibroblast-like synoviocytes,FLS）的增殖抑制作用及其潜在机制。采用20μg/L肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-a,TNF-α)刺激MH7A构建关节炎细胞模型。经不同浓度GB作用于MH7A细胞后，CCK-8法检测细胞活力；Transwell实验检测细胞侵袭力；流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期；实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和蛋白免疫印迹分别检测基因转录和蛋白表达量。与对照组相比，GB对细胞活力的抑制作用呈现出一定的浓度和时间依赖性；GB显著抑制细胞侵袭力、增加细胞凋亡率和G0/G1期比例；GB显著上调细胞Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein,Bax）和p21 mRNA和下降Bcl-2、髓系白血病1(myeloid cell leukemia 1,Mcl-1)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB；又称AKT)、磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）、Cyclin D1和细胞周期调节蛋白激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)mRNA转录水平；同时，GB显著上调Bax、p21和Cleaved-caspase 3蛋白和下调Bcl-2、Mcl-1、p-AKT、p-PI3K、Cyclin D1和CDK4蛋白表达量，且伴有p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和Bcl-2/Bax比值的降低。综上，GB通过抑制PI3K/AKT信号通路，阻滞MH7A细胞G1期向S期转化、抑制细胞活力和侵袭力，并诱导MH7A人成纤维样滑膜细胞凋亡。