Isthmin-1通过上皮-间质转化促进胰腺癌转移侵袭的机制研究

摘要

为了探究isthmin-1(ISM1)对胰腺癌侵袭和转移能力的影响及其潜在机制，本研究利用癌症基因组图谱（TCGA）数据库分析ISM1在胰腺癌患者和正常人胰腺中的表达情况；采用Western blot技术检测胰腺癌细胞系（Aspc1,Bxpc3, PANC1, SW1990）与胰腺上皮细胞系（hPNE）中ISM1蛋白的表达差异；构建ISM1稳定过表达和敲低的细胞模型，通过Transwell侵袭实验和细胞划痕实验评估细胞迁移和侵袭能力的变化。同时，利用Western blot检测上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）关键标志物的表达水平；再利用TCGA和基因表达综合数据库（GEO）分析ISM1下游调控的通路以及促进胰腺癌的侵袭转移的机制；采用免疫沉淀联合质谱分析（IP-MS）筛选ISM1的结合蛋白波形蛋白（vimentin），通过免疫荧光和免疫共沉淀（co-immunoprecipitation, Co-IP）验证ISM1与vimentin的相互作用。使用蛋白质合成抑制剂环己亚胺（CHX）处理过表达ISM1的Bxpc3细胞，检测vimentin的蛋白质稳定性。研究结果表明，ISM1通过抑制vimentin降解，促进EMT过程，进而促进胰腺癌侵袭转移。本研究为阐明胰腺癌转移机制提供了新的实验依据。

关键词

isthmin-1 / 胰腺癌 / 上皮间质转化 / 肿瘤转移 / Transwell实验