脉络宁口服液改善动脉硬化性闭塞症的体外药效与机制

来兴兆; 范玲玲; 黄素清; 黄聪聪; 李剑; 谭宁华

中国药科大学学报 ›› 2025, Vol. 56 ›› Issue (1) : 91 -98.

来兴兆, 范玲玲, 黄素清, 黄聪聪, 李剑, 谭宁华

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摘要

以脂多糖（LPS）诱导小鼠单核巨噬细胞（RAW264.7）建立体外炎症模型，探究脉络宁口服液改善动脉硬化性闭塞症（arteriosclerosis occlusion,ASO）的体外药效与机制。通过MTT法检测RAW264.7细胞活力；Griess试剂法检测一氧化氮（nitric oxide,NO）的浓度；Q-PCR法和Western blot法检测NFAT5/NLRP3信号通路的mRNA与蛋白表达水平；细胞转染NFAT5-siRNA联合Western blot法探究NFAT5与NLRP3的关系；免疫荧光法检测NFAT5核转位。结果显示：脉络宁口服液减少LPS诱导的RAW264.7细胞NO释放，下调NFAT5、NLRP3、caspase1、IL-18和MMP9的mRNA水平，抑制NFAT5、NLRP3、cleaved-caspase1 (p20)的蛋白表达量以及NF-κB-P65磷酸化水平；NFAT5-siRNA显著逆转LPS诱导的RAW264.7细胞中NLRP3的蛋白表达增加；脉络宁口服液与KRN2(NFAT5抑制剂)均能够抑制NFAT5表达与核转位。综上所述，脉络宁口服液在体外通过抑制NFAT5/NLRP3信号通路发挥显著抗炎作用，并且NFAT5可能参与调控NLRP3的表达。