胸腺五肽促进T细胞浸润抑制小鼠肝细胞癌皮下瘤生长的作用研究

摘要

研究胸腺五肽对小鼠肝癌皮下瘤生长的调控作用及机制。构建免疫健全小鼠肝癌Hepa1-6皮下瘤模型，按照瘤体积随机分为3组：对照组、胸腺五肽（thymopentin,TP5）低剂量组（10 mg/kg）、TP5高剂量组（20 mg/kg），评价胸腺五肽对肿瘤生长的干预效果。体外培养Hepa1-6细胞，分别用空白培养基、不同浓度的TP5(10、100、1 000 ng/mL)处理Hepa1-6细胞72 h，采用磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)比色法检测细胞的活性。构建免疫缺陷小鼠的肝癌LM3皮下瘤模型，按照瘤体积随机分为3组：对照组、TP5组（20 mg/kg）及阳性药sorafinib组（30 mg/kg），评价胸腺五肽对免疫缺陷小鼠皮下瘤生长的干预效果。流式细胞术分析Hepa1-6模型TP5给药11 d后肿瘤微环境中T细胞和骨髓来源的免疫抑制细胞（myeloid-derived suppressor cells, MDSCs）的比例变化。体外培养MDSCs，给予TP5，通过检测ROS、IL-6及NO的水平，研究TP5对MDSCs效应分子分泌的影响。进一步构建Hepa1-6小鼠肝癌皮下瘤模型，10 d后按照瘤体积随机分为4组：对照组、TP5低剂量组（10 mg/kg）、TP5高剂量组（20 mg/kg）、缺乏精氨酸的TP5组（15 mg/kg），评价缺乏精氨酸的TP5对肿瘤生长的干预效果。Annexin-V染色检测TP5及缺乏精氨酸的TP5对T细胞存活的影响。实验结果显示TP5抑制免疫健全小鼠肝癌皮下瘤生长（P<0.05），但TP5不影响体外培养的Hepa1-6细胞的增殖且不能抑制免疫缺陷小鼠肝癌皮下瘤生长。此外，TP5增加免疫健全小鼠皮下瘤微环境中的CD4、CD8 T细胞比例，但MDSCs比例降低。TP5不影响MDSCs中ROS、IL-6及NO的水平。TP5促进体外培养的CD4、CD8 T细胞的存活，但缺乏精氨酸的TP5则没有促进作用。研究结果表明TP5可能通过增加肝癌微环境中的T细胞.数量抑制肝癌生长。

关键词

胸腺五肽 / 肝细胞癌 / 肿瘤微环境 / 精氨酸 / T细胞