降钙素基因相关肽对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的作用及其机制

摘要

目的 探讨降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)增殖、迁移的作用及其机制。方法 培养HUVECs,随机分为对照组(Control组)、CGRP组、VEGF抑制剂组(Bevacizumab组)、一氧化氮合成酶抑制剂组(L-NMMA组)。MTT法检测CGRP、贝伐珠单抗、L-NMMA对HUVECs增殖的影响；划痕实验测定HUVECs迁移情况；Western blot和细胞免疫荧光检测相关蛋白表达情况。结果 CGRP与降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like receptor, CRLR)结合能显著促进HUVECs增殖(t=3.434,P<0.05),抑制血管内皮生长因子(VEGF)或内皮型一氧化氮合酶(eNOS)能显著抑制CGRP诱导的HUVECs增殖，主要表现在HUVECs存活率(P<0.05)和内皮细胞标志物(P<0.05)的表达显著降低。划痕实验结果显示抑制VEGF或eNOS可显著抑制CGRP诱导的HUVECs迁移(P<0.05)。抑制VEGF或eNOS能显著降低与增殖密切相关的激酶Raf-1的表达(P<0.05),同时显著抑制其下游ERK(P<0.05)和JNK(P<0.05)信号通路激活。结论 CGRP通过激活VEGF/eNOS-Raf-1-ERK/JNK信号通路诱导HUVECs增殖和迁移，抑制VEGF或eNOS可能是抗血管生成的潜在靶点。

关键词

降钙素基因相关肽 / 血管内皮生长因子 / 一氧化氮 / 内皮细胞增殖