不同长链脂肪酸对小鼠小肠上皮细胞脂质摄取及CD36棕榈酰化的影响

摘要

【目的】探究不同长链脂肪酸对小鼠小肠上皮细胞脂肪酸摄取和分化簇36(Cluster of differentiation 36,CD36)棕榈酰化的影响。【方法】在细胞水平，用长链饱和脂肪酸棕榈酸(Palmitic acid, PA)、长链多不饱和脂肪酸亚油酸(Linoleic acid, LA)、长链单不饱和脂肪酸油酸(Oleic acid, OA)处理小鼠小肠上皮细胞ModeK，通过BODIPY染色比较细胞的脂质摄取情况，采用免疫荧光和Western blot检测CD36的膜定位及棕榈酰化水平，利用棕榈酰化抑制剂评估CD36的棕榈酰化对于脂肪酸摄取的必要性。在活体试验中，对小鼠急性灌胃不同油脂，即猪油、豆油和橄榄油(分别富含PA、LA和OA)，研究小鼠空肠的脂质摄取、血清甘油三酯(Triglyceride,TG)水平及CD36棕榈酰化水平。【结果】BODIPY染色结果显示，添加LA和OA后，ModeK细胞内的平均荧光强度显著高于PA处理的细胞(P<0.000 1)，说明LA和OA促进了小肠上皮细胞对脂质的摄取；免疫荧光结果显示，与PA相比，LA和OA可使CD36更多地定位于质膜上；棕榈酰化检测结果表明，LA和OA可显著升高质膜上CD36的棕榈酰化水平(P<0.05, P<0.001)；此外，棕榈酰化抑制剂2-溴棕榈酸酯(2-Bromopalmitate,2BP)可显著逆转LA和OA对小肠上皮细胞脂质摄取的促进作用(P<0.001, P<0.000 1)。活体急性灌胃结果显示，与灌胃猪油相比，灌胃豆油和橄榄油显著促进空肠上皮细胞脂质摄取(P<0.05, P<0.000 1)，提升血液TG水平以及空肠组织质膜组分中CD36棕榈酰化水平(P<0.05)。【结论】相比于长链饱和脂肪酸PA，长链不饱和脂肪酸LA和OA可显著增加小肠上皮细胞的脂质摄取，OA效果更明显，这可能与长链不饱和脂肪酸促进CD36在质膜上的棕榈酰化水平及定位有关。

关键词

长链脂肪酸 / 小鼠 / 小肠上皮细胞 / 脂质摄取 / CD36 / 棕榈酰化