荷包牡丹碱对家蝇GABA受体作用机理探究

摘要

【目的】探究荷包牡丹碱对杀虫剂重要靶标GABA受体抑制机理。【方法】基于家蝇Musca domestica GABA受体亚基基因MdRdl在第3外显子（a或b）和第6外显子（c或d）交替拼接产生ac、ad、bc和bd剪接体，采用双电极电压钳技术研究荷包牡丹碱对MdRdl 4个剪接体离子电流的抑制效果，鉴定其敏感性是否与外显子交替拼接有关。并采用分子对接技术分析荷包牡丹碱与家蝇GABA受体的可能结合位点。同时，采用共刺激法验证荷包牡丹碱和GABA受体变构抑制剂溴虫氟苯双酰胺是否存在互作效应。【结果】荷包牡丹碱对MdRdl_ac、MdRdl_bc、MdRdl_ad和MdRdl_bd 4个剪接体的IC₅₀分别为1.274、0.948、4.702和3.698 mmol/L；对I274F突变体的IC₅₀分别为15.46、21.67、42.83和52.33 mmol/L；与野生型剪接体相比，4个突变体IC₅₀分别增大约11、22、8和13倍。荷包牡丹碱和溴虫氟苯双酰胺与GABA受体外显子6编码的氨基酸残基存在互作效应。【结论】第274位异亮氨酸残基为荷包牡丹碱与家蝇GABA受体互作的关键靶点，且与外显子6编码的氨基酸残基一起，具有开发协同增效作用的昆虫GABA受体别构抑制剂的潜力。

关键词

荷包牡丹碱 / γ-氨基丁酸受体 / 协同增效 / 分子对接