大黄酸衍生物的合成及抗感染活性评价

摘要

【目的】选择羟基癸酸和癸醇作为修饰物对大黄酸进行结构修饰，提高其脂溶性，降低毒副作用，提升抗感染抗氧化活性，以促进临床应用。【方法】首先，基于大黄酸构效关系，选择大黄酸的羧基与十碳羟基癸酸和癸醇进行酯化反应，合成4种大黄酸衍生物——大黄酸-5-癸醇（R-5HD）、大黄酸-癸醇（R-DA）、大黄酸-10-羟基癸酸（R-10HA）、大黄酸-10-羟基-2-癸烯酸（R-10HDA），通过核磁共振氢谱（¹H NMR）和傅里叶变换红外光谱（FTIR）确定大黄酸衍生物的化学结构特征。其次，采用CCK-8试剂盒测定大黄酸及其衍生物对小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7存活率的影响，确定大黄酸及其衍生物的适用浓度范围。最后，为了验证大黄酸衍生物的抗感染活性，构建脂多糖（LPS）诱导的RAW 264.7细胞模型，测定其对活性氧（ROS）水平，一氧化氮（NO）释放量，肿瘤坏死因子-α （TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）表达量的影响；通过ROS荧光探针双氯荧光黄乙酸乙酯（DCFH-DA）分析大黄酸衍生物的抗氧化活性。【结果】¹H NMR和FTIR结果证明4种大黄酸衍生物成功制备。经体外抗感染模型验证，大黄酸经修饰后毒性显著降低。与大黄酸相比，大黄酸衍生物显著提高RAW 264.7细胞存活率。在LPS处理的RAW 264.7细胞模型中，大黄酸衍生物可以更好地发挥抗感染、抗氧化活性。4种大黄酸衍生物均显著降低NO释放量以及TNF-α、IL-6和IL-1β的表达量，R-DA的抗感染效果最优。与大黄酸相比，大黄酸衍生物均显著抑制ROS的产生。【结论】本研究聚焦于利用十碳羟基癸酸或者癸醇对大黄酸进行结构修饰，通过体外试验证实，R-DA具有更强的抗感染、抗氧化活性，为后续大黄酸衍生物的研究和开发提供了理论依据。

关键词

大黄酸 / 羟基癸酸 / 癸醇 / 大黄酸衍生物 / 抗感染 / 抗氧化