大肠埃希菌质粒编码的bla_KPC-2基因介导碳青霉烯类药物低水平耐药的分子机制

摘要

【目的】明确碳青霉烯酶编码质粒p21QH43K-KPC从肺炎克雷菌Klebsiella pneumoniae转移到大肠埃希菌Escherichia coli后介导碳青霉烯类药物低水平耐药的分子机制。【方法】采用构建EZ-Tn5转座子突变文库、基因敲除、转录组测序和全基因组测序（WGS）等手段，探究bla_KPC-2基因在大肠埃希菌中对美罗培南产生低水平耐药的分子机制。【结果】通过构建接合子EC600/p21QH43K-KPC的EZ-Tn5转座子突变文库，获得1株对美罗培南耐药水平增强的转座子突变株EC600/p21QH43K-KPC-130（MIC=8.000 mg/L）。WGS结果和Mauve分析显示，该转座子插入到染色体omp R基因，同时发现了2个点突变基因ltr A和iron。基因敲除发现，只有omp R缺失突变体对碳青霉烯的敏感性降低，并且可以通过基因回补恢复这一表型。【结论】质粒编码的bla_KPC-2基因在大肠埃希菌中介导碳青霉烯类药物低水平耐药与omp R对bla_KPC-2基因的调控有关。

关键词

大肠埃希菌 / OmpR基因 / 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶-2 / 碳青霉烯类药物 / 耐药性 / 分子机制