表达副猪格拉瑟菌GAPDH和OmP26的重组猪霍乱沙门氏菌构建及免疫学评价

摘要

【目的】构建能同时表达副猪格拉瑟菌Glaesserella parasuis关键抗原GAPDH和OmP26的重组猪霍乱沙门氏菌Salmonella choleraesuis，并评估其作为二联疫苗候选株的潜力，以期为预防G. parasuis和S.choleraesuis感染提供一种新型高效的解决方法。【方法】选取多种血清型的G. parasuis中广泛存在的抗原GAPDH和OmP26作为外源抗原，以S. choleraesuis C500Δasd缺失株为载体，构建同时表达GAPDH和OmP26的G. parasuis-S. choleraesuis重组菌株，并对其生物学特性和免疫效果展开研究。【结果】PCR与测序结果共同表明，本研究成功构建重组菌株C501(pYA-GAPDH-OmP26)，该菌株能稳定携带GAPDH和OmP26基因片段(大小分别为1 020和798 bp)，在连续传代100次中均能稳定扩增目标片段；且生长曲线、生化特性与对照菌C501(pYA3493)一致。重组菌株C501(pYA-GAPDH-OmP26)对S. choleraesuis C78-1和G. parasuis 5型强毒株SH0165的保护率分别为62.5%和50.0%，而C501(pYA3493)对S. choleraesuis C78-1的保护率为50.0%，对G. parasuis 5型强毒株SH0165则无保护作用。【结论】重组沙门氏菌C501(pYA-GAPDH-OmP26)能稳定携带异源基因，具有与亲本菌株相近的生物学特性及良好的表达特性，能够诱导机体对G. parasuis和S. choleraesuis产生联合免疫反应，为G. parasuis-S. choleraesuis二联基因工程疫苗的研发奠定了基础。

关键词

猪 / 副猪格拉瑟菌 / 猪霍乱沙门氏菌 / C500Δasd缺失株 / GAPDH / OmP26