虾肝肠胞虫Septin的生物信息学分析及其在增殖中的潜在作用

摘要

虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是对虾养殖业的重要病原体之一，其裂殖增殖的分子机制尚不明确.本研究通过克隆和分析EHP裂殖期Septin蛋白EhpSeptin的基因序列、表达及定位，初步阐释了该基因在EHP裂殖中的潜在作用.结果表明，EhpSeptin基因序列编码265个氨基酸的蛋白质，分子量约30.4 kDa,等电点4.75.构建EhpSeptin原核表达载体，获得高纯度表达蛋白. Western blotting验证了表达蛋白与天然蛋白一致.此外，本研究建立了EhpSeptin基因显色原位杂交技术(chromogenic in situ hybridization, CISH),分析感染对虾样本中EhpSeptin的表达模式.结果显示，EhpSeptin的表达水平随EHP感染强度增加而升高，表明其参与了EHP的裂殖过程.本研究首次报道了EHP裂殖相关蛋白EhpSeptin的克隆、表达、定位及其在EHP感染过程中的变化规律，为探究EHP裂殖分子机制和防治该病原体的感染提供了理论基础和技术手段.

关键词

虾肝肠胞虫 / Septin / 原核表达 / 显色原位杂交