抑制脯氨酰内肽酶表达对非酒精性脂肪性肝炎小鼠模型的影响及作用机制

摘要

目的 探究脯氨酰内肽酶（PREP）对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）小鼠模型的影响及可能的机制。方法 将18只健康6～8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、NASH组和NASH+迷迭香酸（RA）组，每组6只。正常对照组饲予普通饲料16周，NASH组及NASH+RA组饲予高脂饮食16周，第9周NASH+RA组予加PREP抑制剂RA灌胃，100 mg/kg,1次/d，干预8周。造模和干预结束后处死小鼠，检测不同组别小鼠的血清炎症指标、肝脏甘油三酯（TG）浓度，观察肝脏脂质、炎症、肝纤维化的改变，并计算NAFLD活动度（NAS）积分，应用Western Blot、荧光定量PCR法分别检测各组小鼠肝组织PREP、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、成纤维细胞生长因子21(FGF21)、沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白和mRNA水平。正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t和Dunnett’s-T3检验。不满足正态分布的计量资料多组间比较及进一步两两比较采用Kruskal-Wallis H检验。结果 NASH+RA组小鼠血清IL-6、TNF-α、TG水平均较NASH组显著降低（P值均<0.05）,NASH+RA组肝脂肪变性、肝细胞水肿较NASH组明显减轻，炎细胞浸润较NASH组减少，肝组织病变明显好转。NASH+RA组NAS积分与NASH组相比显著降低（P<0.05）;NASH组血管周围胶原纤维增多，偶见纤维桥连，NASH+RA组的肝脏纤维化与NASH组比较，血管周围胶原纤维稍减少。NASH组肝脏胶原面积百分比较正常对照组明显升高（P<0.05），而NASH+RA组胶原面积百分比较NASH组无明显下降（P>0.05）。NASH+RA组较NASH组PPAR-γ、FGF21、SIRT1蛋白相对表达量显著升高（P值均<0.05），而PREP蛋白相对表达量较NASH组明显降低（P<0.05）。NASH+RA组较NASH组PPAR-γ mRNA、FGF21 mRNA、SIRT1 mRNA相对表达量明显升高（P值均<0.05）,PREP mRNA相对表达量较NASH组显著下降（P<0.05）。结论 PREP通过调控PPAR-γ-FGF21-SIRT1信号通路降低炎症水平，改善小鼠NASH。

关键词

非酒精性脂肪性肝病 / 脯氨酰寡肽酶类 / 小鼠,近交C57BL