姜黄素对嗜热四膜虫的氧化应激、凋亡诱导及线粒体损伤作用

摘要

以嗜热四膜虫为模式生物从氧化应激、凋亡及线粒体损伤作用探讨姜黄素的毒性效应，为姜黄素用药及生态安全提供依据.急性毒性实验：姜黄素(0.625、1.25、2.5μg/mL)作用四膜虫2 h,通过快速细胞分析仪计数细胞，光学显微镜观察细胞形态变化；氧化应激：荧光酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平及乳酸脱氢酶活性(LDH);线粒体损伤：JC-1探针法检测线粒体膜电位(MMP)的变化；凋亡实验：Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)双染流式细胞仪检测细胞凋亡率.实验结果显示，姜黄素对四膜虫的毒性呈剂量依赖效应，0.625、1.25、2.5μg/mL分别抑制了16%、32%、37%,2.5μg/mL处理组细胞形态发生显著变化；此外1.25、2.5μg/mL处理组的细胞内ROS分别增加了35%、44%(P<0.05).LDH的结果表明各浓度的姜黄素均能破坏细胞膜通透性，与对照组相比分别增加了10%、17%、45%.2.5μg/mL的姜黄素处理组能够引起线粒体膜电位(MMP)去极化(P<0.05),凋亡率增加7.42%(P<0.05).姜黄素对嗜热四膜虫存在毒性作用，抑制细胞增殖，并通过氧化应激作用破坏细胞膜，增加细胞膜通透性，2.5μg/mL的姜黄素能够诱导四膜虫细胞凋亡并伴随线粒体损伤，暗示姜黄素可能通过激活线粒体途径诱导嗜热四膜细胞的凋亡.

关键词

嗜热四膜虫 / 姜黄素 / 细胞凋亡 / 线粒体 / 活性氧