自噬对BPD大鼠NLRP3炎症小体的调控作用

摘要

目的:探讨在高氧诱导的新生大鼠支气管肺发育不良（BPD）中自噬和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体之间的关系及其对肺发育结局的影响。方法:用85%O₂制造BPD新生大鼠模型，与常氧（21%O₂）新生大鼠对比，选择生后第3、7、14天的新生大鼠肺组织做病理切片，使用苏木精-伊红染色观察肺组织形态变化（RAC、MLI）,Western blot测肺组织LC3、P62蛋白，确定自噬流变化。雷帕霉素组新生大鼠与高氧组在同一高氧环境中，于生后第2、4、6天予以腹腔注射雷帕霉素。高氧组与常氧组注射同等量生理盐水。选择生后第7天，Western blot测肺组织MTOR、LC3、P62、NLRP3、ASC、cleaved-caspase-1、cleaved-IL-1β,PCR测LC3、NLRP3、cleaved-caspase-1的mRNA,确定其自噬与炎症小体活性之间的关系。结果:肺组织HE染色示生后第7、14天RAC（P<0.05）常氧组均高于高氧组；MLI（P<0.05）高氧组均高于常氧组。Western blot示生后第3、7天LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ（P<0.01）,P62（P<0.05）高氧组均高于常氧组。生后第7天肺组织HE染色示高氧组RAC低于常氧组和雷帕霉素组（P<0.05）,MLI高于常氧组和雷帕霉素组（P<0.05）,生后第7天Western blot示高氧组的MTOR、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62、NLRP3、ASC、cleaved-caspase-1、cleaved-IL-1β均高于正常组和雷帕霉素组（P<0.05）。qPCR示高氧组的LC3mRNA低于正常组和雷帕霉素组（P<0.05）,而NLRP3、caspase-1的mRNA均高于正常组和雷帕霉素组（P<0.05）。结论:自噬流与炎症小体之间的相互作用是BPD发生发展的重要因素，通过增加自噬流可以减少炎症小体的活性，减少cleaved-IL-1β的生成，进而改善BPD,为进一步治疗BPD提供依据。

关键词

支气管肺发育不良 / 自噬 / 炎症小体 / 高氧 / 大鼠