Orexin-A和RJR-2403影响脊髓腹角神经元自发动作电位的比较

摘要

目的:探究食欲素-A（orexin-A）和α₄β₂-N型乙酰胆碱受体（α₄β₂-nAChR）选择性激动剂RJR-2403分别对新生大鼠离体脊髓腹角神经元自发动作电位影响的差异。方法:应用8～12 d新生SD大鼠，麻醉后游离出颈端至骶部的脊髓，保留腰骶膨大节段并制备切片。切片孵育30min,采用木瓜蛋白酶消化19～22 min,转常温孵育45～60 min。沿中央管切取脊髓腹角，使用口径从大到小的巴斯德吸管急性机械分离神经元，静置20 min待细胞贴壁，在倒置显微镜下利用膜片钳记录良好的神经元，联合药理学方法进行功能性研究。在电流钳记录模式下，观察orexin-A和RJR-2403分别对离体脊髓腹角神经元自发放电（动作电位）的影响，并比较多种参数的差异。结果:（1）本研究应用急性分离的脊髓腹角神经元进行膜片钳记录，所记录的神经元胞体完整，形态多样，能发出较多突起且有分支；（2）给予orexin-A前的腹角神经元自发动作电位的频率[（3.55±0.66）Hz]低于给药后[（8.26±3.31）Hz]（P<0.01）,给药前动作电位幅值[（95.28±7.21）mV]高于给药后[（85.15±5.80）mV]（P<0.05）,静息电位和动作电位半幅时程无明显变化；（3）应用RJR-2403前，腹角神经元的静息电位[（-66.67±43.38）mV]高于给药后[（-60.48±3.38）mV]（P<0.01）,给药前放电频率[（2.74±1.60）Hz]低于给药后[（8.94±3.14）Hz]（P<0.001）,给药前动作电位幅值[（84.96±4.85）mV]高于给药后[（73.77±5.42）mV]（P<0.01）,给药前半幅时程[（4.34±1.52）ms]低于给药后[（5.39±1.80）ms]（P<0.01）。结论:Orexin-A和RJR-2403对脊髓腹角神经元自发动作电位均具有正性调制作用，但对于静息电位、半幅时程存在不同作用，可能源于促代谢型受体和促离子型受体介导的作用差异。

关键词

食欲素-A / α₄β₂-N型乙酰胆碱受体 / RJR-2403 / 脊髓腹角神经元 / 自发动作电位

基金资助

国家自然科学基金项目(31200828); 安徽省自然科学基金面上项目(2108085MC91); 安徽省高校学科拔尖人才学术资助项目(gxbjZD2021061); 安徽省高等学校自然科学研究重点项目(KJ2019A0411)