外泌体分泌Trim16在胶质瘤增殖、转移和自噬过程的作用

摘要

目的:探究外泌体分泌三重基序蛋白16(Trim16)在胶质瘤细胞增殖和转移过程中的作用及初步分子机制。方法:生物信息学分析Trim16在胶质瘤中的表达和预后相关性；提取胶质瘤细胞来源外泌体，Western blot和PCR检测Trim16在胶质瘤细胞系中的表达；构建siRNA载体，转染U251和U373细胞，Western blot和RT-PCR检测转染效率，CCK-8、伤口愈合实验和迁移实验检测Trim16沉默对胶质瘤细胞增殖和迁移能力的影响。结果:Trim16在胶质瘤中过表达，受试者工作特征(ROC)曲线提示Trim16诊断胶质瘤的灵敏度较高(AUC=0.901),而总生存期(OS)曲线提示Trim16与胶质瘤预后相关性无统计学意义(P>0.05);透射电镜显示胶质瘤细胞外泌体提取成功；Western blot和RT-PCR实验显示，相较于NC组，si-Trim16 01组、si-Trim16 02组和si-Trim16 03组蛋白水平沉默均降低(P<0.05);CCK-8实验显示，相较于NC组，si-Trim16组OD450值下降(P<0.001);伤口愈合实验显示，相较于NC组，si-Trim16组中伤口愈合能力下降(P<0.01);迁移实验提示，相较于NC组，si-Trim16组中迁移能力下降(P<0.001)。Western blot结果提示，相较于NC组，si-Trim16组中P62蛋白表达增加，LC3BⅠ减少，LC3BⅡ增多。结论:Trim16在胶质瘤细胞外泌体中过表达，且沉默外泌体中Trim16后，影响了胶质瘤细胞的恶性生物学进展。

关键词

胶质瘤 / 外泌体 / 三重基序蛋白16 / 增殖 / 转移