豆腐果苷调控PRKCB启动子区DNA甲基化改善C6细胞凋亡的机制

葛鹏; 张晓彤; 马明悦; 蒋臻熠; 杜鑫; 芦娟; 张袁祥; 童九翠

皖南医学院学报 ›› 2026, Vol. 45 ›› Issue (3) : 227 -233.

葛鹏, 张晓彤, 马明悦, 蒋臻熠, 杜鑫, 芦娟, 张袁祥, 童九翠

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摘要

目的:探究豆腐果苷调控PRKCB在C6细胞凋亡中发挥的作用及分子机制。方法:构建脂多糖(LPS)诱导C6细胞凋亡模型，使用PRKCB过表达质粒、siRNA及豆腐果苷处理C6细胞。CCK-8检测细胞存活率，qRT-PCR检测PRKCB转录水平，流式细胞术检测C6细胞凋亡水平，Western bolt检测凋亡相关蛋白及RAF/MEK/ERK信号通路蛋白的表达水平，亚硫酸氢盐测序PCR(BSP)检测PRKCB启动子区DNA甲基化水平。结果:与Control组相比，LPS刺激可导致C6细胞凋亡水平上升(P<0.05)，并抑制RAF/MEK/ERK信号通路(P<0.05)，而过表达PRKCB可降低C6细胞凋亡水平(P<0.001)并激活RAF/MEK/ERK通路(P<0.01)。豆腐果苷处理可降低LPS刺激导致的C6细胞凋亡(P<0.05)并激活RAF/MEK/ERK通路(P<0.05)，而沉默PRKCB逆转了豆腐果苷对C6细胞凋亡的保护作用(P<0.05)并抑制RAF/MEK/ERK通路(P<0.05)。亚硫酸氢盐测序结果显示LPS刺激上调了PRKCB启动子区的DNA甲基化水平(P<0.001)，而这一作用可被豆腐果苷治疗逆转(P<0.01)。结论:豆腐果苷通过降低PRKCB启动子区DNA甲基化水平，上调PRKCB的表达水平并激活RAF/MEK/ERK通路改善LPS刺激导致的C6细胞凋亡。