IRF5结合p-JNK在脑缺血再灌注损伤中的机制研究

摘要

目的:探讨脑缺血再灌注损伤后干扰素调节因子5(IRF5)的调控机制，并揭示其与磷酸化细胞型Jun蛋白(c-Jun)氨基末端激酶(p-JNK)之间的关系。方法:生物信息学分析筛选脑缺血再灌注损伤中的差异性基因表达，并通过富集分析得出相关分子机制。构建BV2细胞氧糖剥夺再灌注(OGD/R)模型，设置对照组(sham)及OGD 2 h/R 24 h、OGD 4 h/R 24 h、OGD6 h/R 24 h、OGD 8 h/R 24 h等5组实验，使用Western blot检测细胞型Jun蛋白(c-Jun)氨基末端激酶(JNK)、p-JNK和IRF5的表达水平。通过蛋白分子对接技术、免疫共沉淀和免疫荧光技术分析IRF5和p-JNK在脑内的定位及相互作用情况。结果:生物信息学及Western blot实验结果显示，IRF5、JNK和p-JNK在脑缺血再灌注损伤中均呈现高表达。OGD 4 h/R 24 h与sham组相比，IRF5、JNK和p-JNK的表达差异具有统计学意义(IRF5,P<0.001; JNK,P<0.05; p-JNK,P<0.05)。同时，蛋白分子对接分析、免疫共沉淀和免疫荧光实验证实，缺血再灌注损伤可以诱导IRF5与p-JNK相互作用，且过表达IRF5促进p-JNK的表达(P<0.01)，敲低IRF5后抑制p-JNK的表达(P<0.01)。结论:IRF5在脑缺血再灌注损伤中高表达，并与p-JNK结合进入细胞核中发挥促炎作用。

关键词

脑缺血再灌注损伤 / 干扰素调节因子5 / 磷酸化细胞型Jun蛋白氨基末端激酶

基金资助

安徽高校自然科学研究项目(KJ2021ZD0096)