华法林调控PI3K/AKT/eNOS信号通路对糖尿病血管内皮功能障碍的保护作用

左东泽; 程小龙; 方兴

皖南医学院学报 ›› 2026, Vol. 45 ›› Issue (5) : 415 -420.

左东泽, 程小龙, 方兴

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摘要

目的:探究华法林对糖尿病血管内皮功能障碍的影响及其通过PI3K/AKT/eNOS信号通路的作用机制。方法:选取30只SD大鼠随机分为对照组(control)、糖尿病组(DM)和华法林组(warfarin),每组10只。除control组外,其余大鼠采用高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素构建2型糖尿病模型。造模成功后,warfarin组灌胃0.8 mg/kg华法林,control组和DM组给予等量生理盐水,每日1次,连续8周。实验检测包括血管环实验评估内皮依赖性[浓度梯度给予乙酰胆碱(Ach)]与非内皮依赖性[浓度梯度给予硝普钠(SNP)]舒张功能;ELISA法测定血清eNOS、VCAM-1和ICAM-1含量;TUNEL染色观察血管内皮细胞凋亡;Western blot检测主动脉组织PI3K/AKT/eNOS通路蛋白表达。体外实验以HUVECs为对象,分为对照组(control)、高糖组(HG,33 mmol/L葡萄糖)、华法林组(40μg/mL)及华法林+PI3K抑制剂组(LY294002,20μmol/L),检测细胞增殖与迁移能力,细胞上清eNOS、VCAM-1和ICAM-1含量,以及PI3K/AKT/eNOS通路蛋白表达。结果:在动物实验中,与control组比较,DM组大鼠Ach介导的内皮依赖性血管舒张功能减弱(P<0.001),eNOS含量下降,VCAM-1与ICAM-1含量升高,血管内皮细胞凋亡率上升,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及eNOS蛋白表达均降低(P<0.05)。HE染色显示DM组主动脉内膜粗糙、内皮层断裂。与DM组相比,华法林干预改善内皮依赖性舒张功能,提升eNOS含量,降低VCAM-1、ICAM-1水平,减少细胞凋亡,并上调p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和eNOS表达(P<0.05)。在细胞实验中,高糖诱导导致HUVECs增殖、迁移能力下降,eNOS分泌减少,ICAM-1、VCAM-1分泌增加,PI3K/AKT/eNOS通路蛋白表达降低(P<0.05);华法林处理可逆转上述变化,增强细胞功能并激活该通路(P<0.05);而联合LY294002则明显削弱华法林的保护效果。结论:华法林能够通过激活PI3K/AKT/eNOS信号通路,改善糖尿病状态下的血管内皮功能障碍,其作用体现在增强内皮依赖性舒张功能、抑制炎症因子表达、减少细胞凋亡以及促进内皮细胞功能恢复。