大麻二酚通过ROS/NF-κB轴对非小细胞肺癌细胞凋亡的影响

摘要

目的 探讨大麻二酚(CBD)对非小细胞肺癌细胞凋亡的影响及其分子机制。方法 采用CCK8法检测不同浓度大麻二酚对A549细胞的增殖抑制作用；流式细胞术分析大麻二酚对细胞凋亡和线粒体膜电位的影响；使用ROS生化试剂盒检测细胞内活性氧水平；通过Western blot检测大麻二酚对细胞内Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、Cyto-c、p-65、p-p65、I-κBα、p-IκBα等蛋白表达水平的影响。结果 CCK8试验表明，与对照组比较，大麻二酚以浓度依赖性和时间依赖性抑制A549细胞增殖(P<0.01);与大麻二酚组比较，活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)能显著拮抗大麻二酚对细胞的抑制作用(P<0.01)。与对照组相比，大麻二酚显著增加细胞凋亡数目以及升高细胞内活性氧(ROS)水平，同时显著降低线粒体膜电位水平(P<0.001)。进一步Western blot实验表明，与对照组比较，大麻二酚增强Bax、cleaved caspase-3、Cyto-c蛋白的表达，降低Bcl-2蛋白的表达(P<0.01,P<0.001),同时显著降低NF-κB信号通路中p-p65及p-IκBα蛋白的表达(P<0.001),而非磷酸化的p-65和I-κBα蛋白未发现明显变化(P>0.05);与大麻二酚组比较，NAC干预细胞后，Bax、cleaved caspase-3、Cyto-c的蛋白表达水平显著下降，Bcl-2、p-p65及p-IκBα的蛋白表达水平则显著上升(P<0.01,P<0.001)。结论 大麻二酚通过增加ROS水平和抑制NF-κB信号通路，诱导非小细胞肺癌细胞发生凋亡。

关键词

大麻二酚 / A549细胞 / 凋亡 / ROS / NF-κB信号通路