人脐带间充质干细胞来源外泌体调控NOD2缓解炎症性肠病的机制研究

摘要

目的 探索人脐带间充质干细胞来源的外泌体(hucMSC-Ex)在炎症性肠病(IBD)治疗中的潜力，特别是其通过调控核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(NOD2)基因表达缓解肠道炎症的机制。方法 收集2023年8月—2024年3月在镇江市第二人民医院就诊的健康人和肠炎患者的结直肠组织标本，通过免疫组化染色检测NOD2在组织中的表达。分离培养人脐带间充质干细胞；采用超速离心技术获取其分泌的外泌体并结合纳米颗粒跟踪分析技术、透射电镜和蛋白质印迹实验根据大小、形态和蛋白标志物对hucMSC-Ex进行鉴定。构建hucMSC-Ex缓解葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的BALB/c小鼠IBD模型。将小鼠随机分为三组：对照组(喂无菌水)、模型组(喂DSS溶液)和模型组+外泌体组(喂DSS溶液+尾静脉注射外泌体)组，通过疾病活动指数评分、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、苏木素-伊红(HE)染色观测结直肠组织并检测其炎症因子的表达情况。利用qRT-PCR、蛋白质印迹实验、免疫组化染色验证小鼠结直肠组织中NOD2分子的表达。结果 与健康人比较，肠炎患者的结肠组织标本NOD2表达上调。实验提取符合要求的人脐带间充质干细胞来源外泌体。DSS诱导小鼠IBD模型构建成功，且HE染色和炎症因子的定量结果(P<0.001)表明hucMSC-Ex缓解了IBD。与模型组相比，模型组+外泌体组的NOD2分子表达水平在转录水平(P<0.001)、蛋白水平(P<0.05)以及免疫组化染色结果中均显著降低。结论 人脐带间充质干细胞来源的外泌体能够通过降低NOD2分子表达，有效缓解IBD的炎症。

关键词

干细胞 / 外泌体 / IBD / NOD2