双氢青蒿素通过抑制ERK/MAPK通路减轻Aβ诱导的小胶质细胞损伤

摘要

目的 本研究旨在探讨双氢青蒿素(DHA)对β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)干预下小胶质细胞(BV2)形态、胞内Aβ清除能力及细胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路关键分子表达的影响，以阐明DHA是否通过调控ERK/MAPK通路减轻Aβ诱导的BV2细胞损伤，为其神经保护作用提供实验依据。方法 人Aβ1-42是阿尔茨海默病(AD)的关键病理蛋白片段，其在大脑中的异常沉积被认为是AD发病的重要原因之一。基于此，本研究通过建立Aβ1-42诱导的BV2细胞模型，设立对照组(Control组)、模型组(AD组)、DHA组及多奈哌齐组(Donepezil组)。通过形态学观察评估BV2细胞形态变化；利用免疫荧光染色检测胞内Aβ的蓄积与分布；采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ERK/MAPK通路相关基因ERK、RAS、MEK的mRNA表达水平；应用Western blot技术检测RAS和磷酸化MEK(p-MEK)的蛋白表达变化。结果 Aβ1-42干预导致BV2细胞由静息分支状向激活阿米巴样形态转变，胞内Aβ荧光强度显著升高(P<0.05),提示Aβ清除障碍；同时，ERK、RAS、MEK的mRNA表达以及RAS和p-MEK的蛋白水平均显著上调(P<0.05)。经DHA干预后，BV2细胞形态向静息状态部分恢复，胞内Aβ荧光强度显著降低(P<0.05),且呈散在点状分布；ERK/MAPK通路关键分子的mRNA与蛋白表达均被显著抑制(P<0.05)。结论 DHA能够改善Aβ1-42诱导的BV2细胞形态异常，促进胞内Aβ清除，并有效抑制ERK/MAPK信号通路的过度激活。揭示了DHA可能通过调控ERK/MAPK信号通路减轻Aβ1-42诱导的BV2细胞损伤，这为阐释其神经保护作用提供了新的实验依据。

关键词

阿尔茨海默病 / 双氢青蒿素 / β-淀粉样蛋白 / 小胶质细胞 / 丝裂原活化蛋白激酶信号通路

基金资助

黑龙江省自然科学基金项目(LH2021H122); 齐齐哈尔医学院研究生创新基金项目(QYYCX2023-39)