微液滴式PCR检测溶瘤病毒OH2的方法建立及初步应用

摘要

为建立一种特异性强、灵敏度高、稳定性好的微液滴式PCR法（ddPCR法）,用于检测溶瘤病毒OH2的基因拷贝数，对所建立的方法进行扩增线性、灵敏度、定量下限、精密度、选择性验证，并针对反复冻融样本进行稳定性测定。结果显示，该方法具有良好的扩增线性关系（R²>0.98）,灵敏度达1.6 copies/μL,定量下限为5 copies/μL;精密度方面，最大变异系数（CV）为29.8%,偏差（Bias）范围为-30.4%～20.6%。此外，该方法具有较好的选择性和特异性，其提取回收率可满足全血、病毒采样拭子病毒DNA的准确检测，且能对反复冻融样本实现精准检测。上述结果表明，所建立的ddPCR方法可用于OH2的定量检测。

关键词

微液滴式PCR / 溶瘤病毒OH2 / 基因拷贝数