猴痘病毒膜蛋白L1R胞外域三聚体化的免疫应答

摘要

猴痘疫病是由猴痘病毒感染所致的一种病毒性人兽共患病,病毒传播较快。使用Trimer Domain(TD)将病毒膜蛋白L1R(185t)三聚体化修饰,通过电转染CHO细胞进行蛋白表达,纯化后蛋白纯度为99.1%。采用昆虫杆状病毒表达系统病毒膜蛋白L1R(185t)-6×His,将其作为ELISA检测抗体滴度的抗原。体内实验中,对C57BL/6小鼠进行肌肉注射三聚体化病毒膜蛋白L1R(185t)。二次免疫后,小鼠血清中抗L1R(185t)蛋白的特异性IgG抗体水平为6.4×105,三次免疫后抗体水平为1.1264×10～7,两者相比存在显著性差异。采用ELISpot法检测免疫后第54天小鼠脾脏中IFN-γ的表达水平,结果显示免疫组平均斑点数为102,与空白组相比存在显著性差异。研究表明,将猴痘病毒膜蛋白L1R胞外域进行三聚体化修饰,能够有效刺激小鼠产生免疫应答,对后续猴痘病毒相关研究具有重要意义。

关键词

猴痘病毒 / 膜蛋白L1R(185t) / CHO细胞 / 三聚体结构域