基于高分辨质谱法的甘肃青贮紫花苜蓿真菌毒素污染特征

摘要

为了解甘肃省内青贮紫花苜蓿饲料中真菌毒素污染状况，本研究采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Orbitrap HRMS），通过优化色谱、质谱条件，选择凝胶渗透色谱（gel permeation chromatography, GPC）与固相萃取（solid-phase extraction, SPE）双重净化模式降低基质效应，对甘肃省内14个地（州、市）84个取样点的青贮紫花苜蓿饲料中18种真菌毒素进行了检测。结果显示：本研究中优化后的UPLC-QOrbitrap HRMS可一次性精准检验青贮紫花苜蓿中18种真菌毒素。甘肃省内青贮紫花苜蓿中检出率较高的真菌毒素分别是黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1, AFB1)、黄曲霉毒素B2(aflatoxin B2, AFB2)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol, DON）、伏马毒素B1(fumonisin B1, FB1)、伏马毒素B2(fumonisin B2, FB2)、伏马毒素B3(fumonisin B3, FB3)、玉米赤霉烯酮（zearalenone, ZEN），并且在样品检出了隐蔽型真菌毒素D3G(deoxynivalenol-3-glucoside, D3G)和15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇（15-acetyldeoxynivalenol, 15-ACDON）。在84个取样点中，文县、陇县地区青贮紫花苜蓿样本中检出了18种真菌毒素，其中AFB1、赭曲霉毒素A(ochratoxin A, OTA)、T-2毒素（T-2 toxin, T-2）、DON、FB1、FB2、ZEN的含量显著超出参考限值（P<0.05）；平凉、庆阳、天水、定西、白银、兰州地区青贮紫花苜蓿样本中共有17种真菌毒素检出，主要以AFB1、AFB2、黄曲霉毒素G1(aflatoxin G1, AFG1)、黄曲霉毒素M1(aflatoxin M1, AFM1)、DON、FB1、FB2、FB3、ZEN、D3G、15-ACDON为主，其中部分地区AFB1、DON、FB1这3种真菌毒素含量超出参考限值；武威、金昌、张掖、酒泉青贮紫花苜蓿样本中检出9种真菌毒素，以AFB1、DON、FB1、ZEN为主，且均未超出参考限值；甘南迭部县、夏河县、临夏积石山县的青贮紫花苜蓿中未检出任何18种真菌毒素。甘肃境内的青贮紫花苜蓿中真菌毒素含量和种类呈明显的区域性特征，本研究建立的UPLCQ-Orbitrap HRMS可大通量、高精度一次性检验青贮紫花苜蓿中18种真菌毒素，尤其是能准确检测容易漏检的隐蔽型真菌毒素。通过Pearson相关性和冗余分析发现，青贮期平均气温和海拔是影响青贮紫花苜蓿中真菌毒素含量及种类的重要因素，其解释度分别达59.70%和31.20%。

关键词

甘肃 / 紫花苜蓿 / 青贮 / 真菌毒素 / 关联性分析