桑黄-黄芪双向固体发酵菌质的制备及其对人结肠癌HCT116细胞的抑制作用

摘要

目的 以黄芪为发酵基质、桑黄为菌种进行双向固体发酵,探讨发酵菌质对结肠癌HCT116细胞体外抗肿瘤活性。方法 菌种经一级种（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）和二级种（高粱培养基）扩繁后,接种至三级种黄芪发酵基质中进行双向固体发酵。发酵结束后,采用蒽酮-硫酸法、NaNO₂-Al(NO₃)₃比色法和Folin-Ciocalteu法分别测定发酵菌质与黄芪原料中总多糖、总黄酮和总多酚含量;采用单因素试验优化碳酸氢钠（NaHCO₃）添加量、含水量等工艺参数以筛选最优发酵条件;CCK-8法检测各组细胞存活率,比较发酵菌质与黄芪原料的抗肿瘤活性。结果 与黄芪原料相比,发酵菌质总多糖含量由14.02±0.01 mg·g^-1 显著增加至37.61±0.22 mg·g^-1 （P<0.01）;发酵菌质总黄酮含量由17.49±0.05 mg·g^-1 降低至16.34±0.06 mg·g^-1 （P<0.05）,总多酚含量由4.88±0.20 mg·g^-1 降低至3.47±0.13 mg·g^-1 （P<0.05）;最优工艺为NaHCO₃添加量2.0%、含水量59%,此条件下菌丝生长天数最短;CCK-8结果显示,发酵菌质提取物对人结肠癌HCT116细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）为1.835 mg·mL^-1,黄芪提取物IC₅₀为7.590 mg·mL^-1,提示黄芪经桑黄固体发酵后,发酵菌质提取物对HCT116细胞的体外增殖抑制作用较黄芪提取物明显增强（P<0.05）。结论 桑黄-黄芪进行双向固体发酵可显著提升菌质中的多糖成分,其菌质提取物较黄芪提取物具有更强的抗肿瘤活性。

关键词

桑黄 / 黄芪 / 双向固体发酵 / 多糖 / 工艺优化 / 抗肿瘤活性

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