猪嗜血支原体血液直接PCR检测方法的建立和初步应用

孙语阳; 王朝霞; 黄保全; 王金琦; 薛书江; 王淼

doi:10.13478/j.cnki.jasyu.2026.03.008

延边大学农学学报 ›› 2026, Vol. 48 ›› Issue (3) : 65 -70. DOI: 10.13478/j.cnki.jasyu.2026.03.008

猪嗜血支原体血液直接PCR检测方法的建立和初步应用

孙语阳, 王朝霞, 黄保全, 王金琦, 薛书江, 王淼

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摘要

为建立简便高效、适配基层的猪嗜血支原体（Mycoplasma suis）检测方法，该研究构建猪嗜血支原体血液直接PCR检测技术，为该病的临床快速诊断和流行病学调查提供技术支持。参考GenBank数据库中猪嗜血支原体基因序列设计特异性引物，优化退火温度，并开展特异性、敏感性及重复性试验。结果表明，该方法可特异性扩增出170 bp目的片段，与猪圆环病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒等常见猪源病原均无交叉反应，以1μL原始血液样本进行检测，最低可检出40倍稀释的血液样品。采用该方法与常规PCR技术同步检测延边朝鲜族自治州两家规模化猪场150份猪抗凝血液样本，二者阳性占比均为1.33%，总符合率、阳性符合率、阴性符合率均为100%。综上，该研究建立的猪嗜血支原体血液直接PCR检测方法，无须对血液样本进行DNA提取等前处理步骤，操作便捷、检测周期短、结果准确可靠，能够满足猪嗜血支原体病现场快速诊断和大规模流行病学调查的实际需求，具有较高的临床应用价值和推广前景。