EV71感染人胶质瘤细胞U251蛋白质组学特征分析

摘要

目的:基于蛋白质组学技术，分析EV71感染人胶质瘤细胞系U251的蛋白表达谱变化，探讨EV71感染导致U251细胞病变的潜在分子特征。方法:将MOI=0.1的EV71病毒接种于人胶质瘤细胞系U251,构建体外感染模型。采用光学显微镜观察细胞病变效应(CPE);CCK-8法检测细胞增殖活力；Western blot和免疫荧光检测病毒衣壳蛋白VP1表达；基于高通量蛋白组学技术分析细胞差异蛋白表达谱。结果:EV71感染U251细胞后呈现典型CPE;细胞增殖能力降低，存活率明显下降；Western blot和免疫荧光显示EV71感染后VP1蛋白表达高于对照组；蛋白质组学鉴定到6 326个蛋白质，其中103个表达上调；106个表达下调。GO功能和KEGG通路富集分析表明，差异蛋白主要富集于溶酶体通路(下调)、抗原处理和呈递(下调)及代谢通路(上调)。结论:EV71感染改变了U251细胞的蛋白表达谱，其机制可能与抑制溶酶体和抗原呈递功能，以及激活细胞代谢等通路相关。

关键词

肠道病毒71型 / 人神经胶质瘤U251细胞 / 蛋白质组学