益气康萎汤通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路抑制慢性萎缩性胃炎大鼠胃上皮细胞焦亡的机制研究

摘要

目的:观察益气康萎汤对慢性萎缩性胃炎（CAG）大鼠胃黏膜损伤的改善作用，并探究其抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路介导的胃上皮细胞焦亡的可能机制。方法:39只SD雄性大鼠随机分为对照组（n=6）与模型组（n=33）,模型组建立慢性萎缩性胃炎模型，造模成功的30只大鼠随机分为CAG模型组、益气康萎汤低剂量组、益气康萎汤中剂量组、益气康萎汤高剂量组和维酶素组，每组各6只。阳性药组灌胃维酶素(200 mg·kg^-1·d^-1);对照组和CAG模型组大鼠灌胃等量生理盐水，持续4周。干预期间观察大鼠一般症状，每周检测大鼠体质量，干预结束后通过HE染色观察胃组织病理情况，ELISA测血清胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅡ）,并计算PGⅠ/PGⅡ比值（PGR）及胃液中白细胞介素18（IL-18）、白细胞介素1β（IL-1β）水平，免疫组化检测胃组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）、消皮素D N端片段（GSDMD-N）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达，Western blot检测胃组织中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）、裂解Caspase-1（cleaved Caspase-1）、IL-18、IL-1β、裂解IL-1β（cleaved IL-1β）、消皮素D（GSDMD）、GSDMD-N、NLRP3、核因子κB（p65）和磷酸化核因子κB（p-p65）蛋白表达。结果:与CAG模型组比，益气康萎汤能够改善大鼠精神状态并增加体质量；改善胃组织病理形态，降低病理学评分（P<0.05）;降低血清中PGⅠ（P<0.05）,增加PGⅡ及PGR（P<0.05）,降低胃液中IL-18和IL-1β水平（P<0.05）;降低胃组织中NLRP3、GSDMD-N和HMGB1的表达（P<0.05）;降低cleaved Caspase-1、IL-18、cleaved IL-1β、GSDMD-N、NLRP3和p-p65蛋白表达（P<0.05）。结论:益气康萎汤可能通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路抑制CAG大鼠细胞焦亡及炎症的发生来缓解胃萎缩和胃组织损伤，为CAG的治疗提供新的理论依据和治疗思路。

关键词

慢性萎缩性胃炎 / 益气康萎汤 / 细胞焦亡 / 炎症 / NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路

基金资助

四川省中医药管理局面上项目(2024MS174)