丁酸调控EV71感染相关肠上皮屏障功能的机制研究

摘要

目的:探讨丁酸在肠道病毒71型(EV71)感染过程中对肠上皮屏障功能的调控作用及其分子机制。方法:采用Transwell小室构建Caco-2/HT29-MTX共培养体外肠上皮屏障模型并建立EV71感染体系，设置对照组、EV71组、EV71+丁酸组、ANT(GPR41/43拮抗剂)+EV71组及ANT+EV71+丁酸组。采用Western blot检测GPR41、GPR43及紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1、ZO-1表达水平；采用ELISA检测黏蛋白2分泌水平；采用实时荧光定量PCR检测Transwell下室EV71 RNA水平。结果:与对照组相比，EV71组GPR41、GPR43及紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1、ZO-1表达水平均降低(P<0.05),MUC2分泌水平明显下降(P<0.05);与EV71组相比，EV71+丁酸组上述蛋白表达及MUC2分泌水平均升高(P<0.05);与EV71+丁酸组相比，ANT+EV71+丁酸组的GPR41、GPR43、Occludin、Claudin-1、ZO-1蛋白表达和MUC2分泌水平均下降(P<0.05)。RT-qPCR显示，EV71+丁酸组较EV71组的EV71 RNA表达降低(P<0.05),而ANT+EV71+丁酸组较EV71+丁酸组升高(P<0.05)。结论:丁酸可通过GPR41/43相关信号通路增强肠上皮屏障功能并减少EV71跨上皮穿透，其机制可能与上调紧密连接蛋白表达及促进MUC2分泌有关。

关键词

丁酸 / 肠道病毒71型 / 紧密连接 / 黏蛋白2 / 肠上皮屏障

基金资助

江苏省高校重点实验室开放课题(XZSYSKF 2024040); 宿迁市科技计划资助(No.K202428)