凡纳滨对虾WSSV、SHIV和BP病毒PCR同步检测方法的优化及初步应用

摘要

本研究针对养殖凡纳滨对虾白斑综合征病毒（white spot syndrome virus,WSSV）、虾血细胞虹彩病毒（shrimp hemocyte iridescent virus,SHIV）、对虾杆状病毒（baculovirus penaei,BP）3种常见的DNA病毒，建立聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）同步检测法，为高效、精准检测养殖对虾病害提供理论基础和技术支撑。根据NCBI公布的WSSV、SHIV和BP基因序列，设计特异性引物并制备质粒，建立同步检测3种病毒的PCR方法，并应用梯度稀释质粒法进行灵敏度测试。结果表明：新建立的检测方法灵敏度高、检测时间短及检测结果准确性高，该方法对WSSV和SHIV的检测下限均为1 fg,BP检测下限为0.1 fg。利用本方法分别于2023年10月9日和2024年5月11日对渤海地区102份凡纳滨对虾样品中的WSSV、SHIV、BP进行检测，结果发现2023年10月9日成虾WSSV、SHIV和BP阳性率分别为0、80.4%和98.0%,2024年5月11日虾苗WSSV、SHIV和BP的阳性率均为0，与常规单一PCR检测结果相比，符合率达到100%。综上所述，本检测技术可有效用于对虾养殖过程中WSSV、SHIV和BP 3种病原的快速检测和诊断，为养殖生产中实时监测病害提供优质技术服务。

关键词

凡纳滨对虾 / 白斑综合征病毒 / 虾血细胞虹彩病毒 / 对虾杆状病毒 / PCR同步检测