香港牡蛎cyclin C基因组织分布特征与免疫原性分析

李云燕; 贾春; 周秋伶; 郭靖; 黄成铖; 邱衡通

水产学杂志 ›› 2026, Vol. 39 ›› Issue (4) : 24 -32.

李云燕, 贾春, 周秋伶, 郭靖, 黄成铖, 邱衡通

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摘要

近年来，香港牡蛎（Crassostrea hongkongensis）作为广西北部湾重要经济贝类之一，养殖规模持续扩大，其在复杂环境下的生长调控机制亟待解析。细胞周期蛋白C(Cyclin C,CCNC)是转录调控型周期蛋白家族成员，Cyclin C-CDK8复合物直接参与应激反应相关基因的转录调控，而环境胁迫会诱发Cyclin C由细胞核到细胞质的释放与降解。鉴于Cyclin C在基因转录调控中发挥的重要作用，本研究以香港牡蛎鳃组织cDNA为模板，通过PCR扩增得到cyclin C(ChCCNC)cDNA序列，长度为1 207 bp，其中开放阅读框852 bp，可编码283个氨基酸残基；生物信息学分析显示，该蛋白在动物中具有高度保守性，含有25个潜在磷酸化位点和2个周期蛋白框；利用qPCR技术研究了ChCCNC mRNA组织表达模式，发现在被检测组织中均有表达，其中，在性腺中表达量最高，在外套膜中表达量最低，但不同组织之间转录水平总体差别不大；经双酶切系统构建原核表达载体pET-32a(+)-ChCCNC后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中，以IPTG大量诱导并运用Ni-NTA纯化得到的重组蛋白具有良好的免疫原性。本研究结果可为深入研究贝类转录调控型Cyclin对生长发育的调控机理提供重要理论基础。