槐耳菌质对人胆管癌细胞侵袭与迁移的影响及其作用机制

摘要

背景与目的：胆管癌作为罕见的恶性肿瘤，难以诊断，往往在晚期才被发现，只能选择姑息疗法，但是常规的化疗药物对胆管癌治疗效果较差，急需寻找新的治疗药物。本研究探讨槐耳菌质对人胆管癌细胞恶性生物学行为的影响，及其与TGF-β/Smad通路的关系，旨在为槐耳菌质治疗胆管癌提供理论依据。方法：用不同浓度槐耳菌质孵育人正常肝细胞L-02和人胆管癌细胞HuCCT1不同时间后，检测细胞增殖情况，并计算半数抑制浓度(IC₅₀)；将HuCCT1细胞分为阴性对照组（无干预）、阳性对照组（15 mg/L顺铂）和不同浓度槐耳菌质干预组(根据浓度与时间为预实验结果选择1/5 IC₅₀、2/5 IC₅₀和IC₅₀)，用划痕试验与Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力，同时用Western blot检测HuCCT1细胞中TGF-β/Smad通路相关蛋白的表达。结果：只有较高浓度的槐耳菌质（>312.5 mg/L）对L-02细胞的增殖有明显抑制作用；当浓度超过5 mg/L时，槐耳菌质能明显抑制HuCCT1细胞增殖，且呈浓度依赖性（均P<0.05）,IC₅₀分别为24 h:138.52 mg/L、48 h:99.41 mg/L、72 h:113.52 mg/L。与阴性对照组比较，阳性对照组与三种浓度（20、40、100 mg/L）的槐耳菌质干预组HuCCT1细胞迁移距离、侵袭细胞数减少，TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4、N-cadherin、Snail和Slug表达降低，E-cadherin表达增加（均P<0.05）；与阳性对照组比较，三个槐耳菌质干预组的上述变化更弱，但呈明显的浓度依赖性（均P<0.05）。结论：槐耳菌质可以抑制HuCCT1细胞恶性生物学行为，其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad通路活性有关。

关键词

胆管肿瘤 / 细胞增殖 / 肿瘤侵润 / 槐耳菌质