microRNA-9的表达及其负性调控BAG4对胃癌细胞增殖与侵袭的影响

王军; 陈燕; 闵光涛; 朱俊亚; 吕坤; 乐奇; 姜雷

中国普通外科杂志 ›› 2024, Vol. 33 ›› Issue (08) : 1264 -1273.

王军, 陈燕, 闵光涛, 朱俊亚, 吕坤, 乐奇, 姜雷

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摘要

背景与目的：研究显示，micro RNA-9 (mi R-9)在多种恶性肿瘤中表达下调，但其在胃癌中的表达情况及功能尚有待明确。笔者前期通过生物信息学方法预测Bcl-2相关永生基因4 (BAG4)可能是mi R-9的靶基因，并且发现BAG4在胃癌组织中呈高表达。因此，本研究探讨mi R-9在胃癌中的表达与功能，及其与BAG4的关系。方法：采用q RT-PCR法检测胃癌组织与癌旁组织，以及胃癌细胞系与正常胃黏膜细胞中mi R-9的表达水平。分别用mi R-9模拟物和mi R-9抑制物过表达和敲低胃癌细胞的mi R-9后，采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖活性，Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。荧光素酶报告基因实验分析mi R-9和BAG4的靶向关系，并用q RT-PCR法和Western blot检测转染mi R-9模拟物和si-BAG4的胃癌细胞中BAG4的表达，以及相关功能实验加以验证。结果：mi R-9在胃癌组织（vs.癌旁组织）和胃癌细胞系（vs.正常胃黏膜细胞）中的表达均明显降低（均P<0.05）。mi R-9的表达与胃癌患者的肿瘤大小、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移和TNM分期明显有关（均P<0.05）。mi R-9高表达胃癌患者的总生存率明显高于mi R-9低表达胃癌患者（P=0.028）。胃癌细胞过表达mi R-9后，增殖和侵袭能力明显减弱，而敲低mi R-9后，增殖和侵袭能力明显增强（均P<0.05）。荧光素酶报告基因实验显示BAG4是mi R-9下游的靶基因。转染mi R-9模拟物或si-BAG4的胃癌细胞中BAG4的m RNA与蛋白表达均明显降低，而转染mi R-9抑制物胃癌细胞中BAG4的m RNA与蛋白表达均明显降低（均P<0.05）。转染si-BAG4的胃癌细胞的增殖与侵袭能力明显降低，同时转染mi R-9抑制物可逆转si-BAG4对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响（均P<0.05）。结论：mi R-9在胃癌中表达降低，且其表达与胃癌的不良生物学特征密切相关，其作用机制可能通过负性调控BAG4的表达，从而影响胃癌细胞的增殖和侵袭。