瑞戈非尼联合PD-L1单抗对小鼠肝癌移植瘤的作用及机制

摘要

背景与目的：瑞戈非尼治疗肝癌不可避免的存在毒副作用，而且治疗有效率有限。细胞程序性死亡-配体1 (PD-L1)单抗可有效阻断“肿瘤免疫逃逸机制”，发挥显著抗肿瘤作用。因此，本研究探讨瑞戈非尼联合PD-L1单抗对肝癌移植瘤小鼠的抗癌作用。方法：将Balb/C裸小鼠建立肝癌移植瘤模型后，分别给予瑞戈非尼（瑞戈非尼组）、阿替利珠单抗（PD-L1单抗组）、瑞戈非尼+阿替利珠单抗（联合组）、生理盐水（模型组）处理，连续4周，期间动态测量各组肿瘤体积。4周后，剥离各组小鼠移植瘤，分别用流式细胞术、TUNEL法、HE染色检测肿瘤组织CD4+和CD8+细胞浸润情况、细胞凋亡率及形态特征，并用q RT-PCR和Western blot检测肿瘤组织CD31、血管内皮生长因子（VEGF）、增殖细胞核抗原（Ki-67）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bax表达。结果：给药前4组小鼠肿瘤体积差异无统计学意义（P>0.05），给药1、2、3、4周时，各给药组小鼠肿瘤体积均明显小于模型组，且联合组的肿瘤体积明显小于两个单药组（均P<0.05），但两个单药组间肿瘤体积无明显差异（均P>0.05）。各给药组肿瘤组织中CD4+与CD8+细胞比例均较模型组明显升高，且升高程度依次为瑞戈非尼组<联合组（均P<0.05）。各给药组肿瘤组织细胞凋亡率均较模型组明显升高，且升高程度依次为瑞戈非尼组<联合组（均P<0.05）。HE染色显示，模型组肿瘤细胞核大、深染、排列密集，各给药组肿瘤细胞均出现不同程度的核皱缩、细胞数量减少，片状坏死等改变，联合组改变最为明显。与模型组比较，各给药组肿瘤组织CD31、VEGF、Ki-67和Bcl-2 mRNA与蛋白表达水平明显降低，Bax mRNA与蛋白表达水平明显升高，且联合组的以上指标变化程度明显大于两个单药组，但两个单药组间差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论：瑞戈非尼联合PD-L1单抗可有效抑制肝癌生长，且强度大于两者单独作用，这可能由两者不同的作用机制的协同效应实现的。

关键词

肝肿瘤 / 肿瘤移植 / 小鼠 / 瑞戈非尼 / 阿替利珠单抗