核转运蛋白α2通过ERK信号通路调控乳腺癌细胞生物学行为的研究

摘要

背景与目的：核转运蛋白α2 (KPNA2)异常表达能增强乳腺癌细胞迁移和侵袭能力，导致肺转移风险，并与乳腺癌患者不良预后相关。本研究进一步分析KPNA2在乳腺癌细胞中的表达情况，并探讨其对乳腺癌细胞生物学行为影响的相关机制。方法：用免疫组化检测62例乳腺癌患者癌组织与癌旁组织标本中KPNA2的表达。将两种人乳腺癌细胞株（MDA-MB-453、MCF-7）分为阴性对照组（转染空白质粒）、KPNA2敲低组（转染KPNA2 siRNA）、ERK抑制剂组（ERK抑制剂U0126处理）、联合组（转染KPNA2 siRNA联合U0126处理）。各组细胞处理48 h后，分别用qRT-PCR与Western blot检测KPNA2 mRNA与蛋白表达，并分别用MTT法、流式细胞术、Transwell实验、Western blot检测细胞增殖、凋亡、侵袭能力，以及ERK1/2通路与凋亡相关蛋白表达的变化。结果：免疫组化结果显示，KPNA2蛋白在乳腺癌组织中表达水平高于癌旁组织（2.48±0.39 vs. 1.28±0.22,P<0.05）。qRT-PCR与Western blot结果显示，两种乳腺癌细胞株的阴性对照组和ERK抑制剂组的KPNA2 mRNA及蛋白表达水平均无明显差异（均P>0.05），而KPNA2敲低组和联合组KPNA2 mRNA和蛋白表达下调（均P<0.05）。功能实验结果显示，与各自的阴性对照组比较，ERK抑制剂组、KPNA2敲低组和联合组的细胞增殖率降低、凋亡率升高、细胞侵袭能力减弱，其中联合组各项变化最为明显（均P<0.05）。Western blot结果显示，与各自的阴性对照组比较，ERK抑制剂组、KPNA2敲低组和联合组磷酸化ERK1/2、裂解的胱天蛋白酶3蛋白表达均下调，且联合组两者的下调程度最为明显（均P<0.05）。结论：乳腺癌组织中KPNA2表达水平升高，其增强乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的作用可能与活化ERK信号通路有关，KPNA2有望作为乳腺癌药物开发的新靶点。

关键词

乳腺肿瘤 / α核胞浆转运蛋白类 / 细胞增殖 / 肿瘤侵润