长链非编码RNA FGD5-AS1调控miR-142-3p/PDK1信号轴在胃癌中的作用及机制

摘要

背景与目的：研究显示，长链非编码RNA(lncRNA) FGD5-AS1在胃癌（GC）中发挥致癌基因的作用。笔者前期通过生物信息学分析发现，FGD5-AS1与微小RNA-142-3p(miR-142-3p)、miR-142-3p与丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)之间存在结合位点。因此，本研究探讨FGD5-AS1靶向miR-142-3p/PDK1对GC细胞中的表达及作用。方法：利用双荧光素酶报告基因实验验证FGD5-AS1与miR-142-3p、miR-142-3p与PDK1之间的靶向关系。采用qRT-PCR检测GC组织中FGD5-AS1、miR-142-3p和PDK1的表达水平。构建sh-FGD5-AS1干扰体系及miR-142-3p抑制模型，分别或联合转染GC细胞系BGC823，观察细胞增殖（CCK8、EdU）、凋亡（流式细胞术）、迁移与侵袭（Transwell）等生物学行为及相关蛋白表达（Western blot）。通过裸鼠皮下成瘤实验检测FGD5-AS1对GC移植瘤生长的影响。结果：双荧光素酶报告基因实验显示，miR-142-3p mimic可明显降低FGD5-AS1和PDK1野生型（WT）报告基因的荧光活性（均P<0.05），而对突变型（MUT）无影响，证实FGD5-AS1与miR-142-3p、miR-142-3p与PDK1之间存在直接结合关系。敲除FGD5-AS1后，GC细胞中miR-142-3p表达上调，PDK1表达下调，细胞增殖、迁移、侵袭能力减弱，凋亡增强，上述变化可被miR-142-3p抑制剂逆转（均P<0.05）。动物实验显示敲除FGD5-AS1可明显抑制裸鼠移植瘤的生长及移植瘤组织中Ki-67、PDK1表达（均P<0.05）。结论：FGD5-AS1可能通过ceRNA机制靶向吸附miR-142-3p，从而解除对PDK1的抑制，促进GC细胞的增殖与侵袭，并加速肿瘤生长。FGD5-AS1/miR-142-3p/PDK1轴在GC发生发展中发挥关键作用，或可作为潜在的诊疗靶点。

关键词

胃肿瘤 / RNA,长链非编码 / 微RNAs / 丙酮酸脱氢酶激酶1 / 肿瘤侵润