柴胡皂苷D通过调控VEGF/ERK/HIF-1α信号轴抑制结直肠癌血管生成的实验研究

摘要

背景与目的：结直肠癌（CRC）是全球第四大常见癌症，血管生成异常是其进展的关键因素。柴胡皂苷D (SSD)作为中药柴胡的活性成分，具有潜在抗肿瘤作用，且其部分作用可能与血管生成有关。本研究探讨SSD对CRC细胞在裸鼠体内生长的影响，及其与血管生成相关VEGF/ERK/HIF-1α信号通路的关系。方法：于雄性Balb/c裸鼠背部皮下接种人CRC SW480细胞以建立荷瘤裸鼠模型，并随机分为模型组（生理盐水）及低、中、高3个剂量（5、10、20 mg/kg/d） SSD治疗组，每组各8只，腹腔注射给药，连续15 d。记录肿瘤体积并绘制生长曲线；剥离瘤体，称重并计算抑瘤率；HE染色观察肿瘤组织病理学变化；用CD31免疫组化定量肿瘤微血管密度（MVD）;qRT-PCR检测肿瘤组织中血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮生长因子受体2 (VEGFR-2) mRNA表达水平；Western blot法检测肿瘤组织中VEGFA、VEGFR-2、缺氧诱导因子1α (HIF-1α)、细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)、p-ERK1/2表达水平。结果：与模型组比较，SSD呈剂量依赖性抑制肿瘤生长（均P<0.05），高剂量组抑瘤率达62.15%;HE染色显示，模型组移植瘤组织细胞密度大，排列无序，大小形态不规则，核异型性明显，SSD给药后移植瘤组织见有散在坏死灶，细胞密度减小，细胞核固缩、裂解；与模型组比较，3个剂量SSD治疗组肿瘤组织中MVD、VEGFA、VEGFR-2 mRNA与蛋白相对表达量，以及HIF-1α和p-ERK1/2蛋白相对表达量均降低，且均呈明显的剂量依赖性（均P<0.05）。结论：SSD可抑制CRC移植瘤在裸鼠体内的生长，其部分作用机制可能与干扰VEGF/ERK/HIF-1α信号通路激活，进而降低肿瘤组织中血管生成有关。

关键词

结直肠肿瘤 / 柴胡皂苷D / 新生血管化,病理性 / 异种移植模型抗肿瘤试验